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    結果分析

    在分析轉錄調控作用位點時,一般先采取Luciferase片段缺失實驗初步分析,確定目標調控因子是否調控目標基因的轉錄及大概的作用區域。對縮小范圍的區域進行生物信息學預測可能位點后,采用Luciferase定點突變實驗確定真正的轉錄調控位點。標準結果及結論如下所示:

     

    1 Luciferase片段缺失實驗

    Luciferase片段缺失實驗.png

    經檢測發現多次裁切對熒光素酶表達量產生的影響相同(即檢測組與空白組有明顯差異,但各裁切的檢測組間沒有明顯差異),故可推斷轉錄調控位點應位于-282~近啟動子端區域。

     

    2 Luciferase定點突變實驗

    Luciferase定點突變實驗 .png

    對不同位點(生物信息學預測)分別進行點突變,LXRE2位點突變后的檢測組與野生型的檢測組間存在明顯差異,而LXRE1位點突變后的檢測組與野生型的檢測組間沒有明顯差異,故可推斷轉錄調控位點應為LXRE2。


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